Beeinflussung der Enzymaktivität

Zur Veranschaulichung der folgenden Betrachtungen führen wir wieder einen (hypothetischen) Versuch durch. Wir stellen uns wieder eine Glucosedecarboxylase vor, die in der Lage ist, Kohlendioxid aus Glucose abzuspalten, und zwar so, dass man das freigesetzte CO₂ auch messen kann.

Übrigens: Die Suche nach Glucosedecarboxylase im Internet ist nicht sehr erfolgreich, es gibt zwar über 180 Fundstellen, aber in den Fundstellen findet man dann das Wort "Glucosedecarboxylase" nicht, sondern meistens "glucose dehydrogenase" (englisch) und auf der gleichen Seite dann "glucuronate decarboxylase", so zum Beispiel in dem Budh "Polysaccarides in Food" von BLANSHARD und MITCHELL auf Seite 9.

Wenn Sie in der nächsten Zeit das Suchwort Glucosedecarboxylase in ihre Suchmaschine eingeben, werden Sie mit hoher Wahrscheinlichkeit auf diese Seite hier stoßen, da der Begriff Glucosedecarboxylase mehrmals erwähnt wird - jetzt schon wieder. Tatsächlich habe ich Anfang März 2016 wieder mal einen Test gemacht nach Glucosedecarboxylase gesucht. Diese Seite wurde bei Google als erste angezeigt!

Aktualisierung April 2018: Diese Seite wird bei Google immer noch an erster Stelle angezeigt!

Glucoselösung der Konzentration c(Glucose) = 0,1 mol/l wird auf zehn Reagenzgläser verteilt. Mithilfe von Wasserbädern werden die Reagenzgläser auf verschiedene Temperaturen gebracht. Dann nehmen wir das (hypothetische) Enzym Glucosedecarboxylase, welches aus den Glucose-Molekülen je ein CO

-Molekül abspaltet. Wir stellen eine wässrige Lösung des Enzyms her und geben von dieser Lösung genau 10 Tropfen in jedes Reagenzglas. Wir haben jetzt also 10 Reagenzgläser mit gleichen Glucosekonzentrationen, aber jeweils

Wir messen nun das Kohlendioxid, das in einer bestimmten Zeit von jedem Reagenzglas freigesetzt wird (Bläschenzählmethode, Auffangen des Gases in einem kleinen Kolbenprober etc.).

Die Enzymaktivität kann nun relativ leicht gemessen werden, z.B. durch Auffangen des gebildeten Kohlendioxids.

Erwartungen:

Aus der physikalischen Chemie ist bekannt, dass die Geschwindigkeit einer chemischen Reaktion mit der Temperatur steigt. Nach der RGT-Regel führt eine Temperaturerhöhung von 10 K oder 10 ºC zu einer Verdopplung, Verdreifachung oder sogar Vervierfachung der Reaktionsgeschwindigkeit. Am meisten Kohlendioxid müsste demnach in dem Reagenzglas Nr. 10 entstehen.

Beobachtungen:

Die Erwartungen werden nicht erfüllt. In der folgenden Tabelle sind die Messwerte eines solchen (hypothetischen) Versuchs dargestellt:

Hier die graphische Auswertung:

Wieso erkennt man auf der Graphik eine deutliche Optimumskurve und keine kontinuierliche Steigerung der Enzymaktivität?

Erklärung

Der RGT-Regel sind in lebenden Zellen zwei deutliche Grenzen gesetzt. Unterhalb von 0 ºC bilden sich Eiskristalle in der Zelle, dadurch werden wichtige Strukturen zerstört und die Enzyme können nicht mehr oder nicht mehr richtig arbeiten. Natürlich gibt es einige Lebewesen, die sich im Laufe der Evolution an niedrige Temperaturen angepasst haben und zum Beispiel die Bildung von Eiskristallen mithilfe chemischer Substanzen unterbinden können ("Frostschutzmittel"), das ist aber die Ausnahme.

Oberhalb von 40 bis 50 ºC denaturieren die meisten Proteine, so dass sie nicht mehr arbeiten können. Auch hier gibt es wieder viele Lebewesen, die sich im Laufe der Evolution an hohe Temperaturen angepasst haben, ihre Enzyme sind auch bei 60 oder 70 ºC noch voll arbeitsfähig, aber auch das ist die Ausnahme, über die wir hier nicht reden müssen.

Normale Enzyme haben daher einen Temperaturbereich, in dem sie mit maximaler Geschwindigkeit arbeiten, und dieser Temperaturbereich liegt bei "normalen" physiologischen Temperaturen um 20 bis 30 ºC. Dort hat die Enzymaktivitäts-Temperatur-Kurve ihr mathematisches Maximum; in der Biologie spricht man hier allerdings von einem Optimum.

Weitere Einzelheiten siehe auch: "Beeinflussung der Tertiärstruktur" in dem Abschnitt über Proteine sowie "Denaturierung" auf meinen Ernährungslehre-Seiten.

Enzyme sind temperaturabhängig. Bei zu niedrigen Temperaturen friert die Zelle ein, bei zu hohen Temperaturen denaturieren die Proteine. Daher hat jedes Enzym einen Temperaturbereich, in dem es optimal - also mit maximaler Geschwindigkeit - arbeitet.

Einen ähnlichen Versuch kann man jetzt durchführen, um die Abhängigkeit der Enzymaktivität vom pH-Wert zu ermitteln. Dazu gibt man die gleiche Konzentration Glucose in Reagenzgläser mit verschiedenen pH-Werten zwischen 3 und 12. Auch hier kann man bei der Auswertung und Darstellung der Messergebnisse eine Optimumskurve beobachten.

Enzyme sind pH-abhängig. Bei zu niedrigen oder zu hohen pH-Werten arbeiten Enzyme nicht mehr optimal, weil sie denaturiert sind. Jedes Enzym hat einen pH-Wert, an dem es optimal arbeitet, das pH-Optimum.

Warum diese pH-Abhängigkeit besteht, ist auf den Protein-Seiten sehr schön erklärt, daher erübrigt sich hier eine Wiederholung der Ausführungen. Besuchen Sie bitte die entsprechenden Protein-Seiten in der Cytologie-Abteilung dieser Homepage oder die Seite "Denaturierung" auf den Ernährungslehre-Seiten.